論文紹介

図１　PsRBR1タンパク質のリン酸化状態の検出
頂芽切除24時間後の腋芽から抽出したタンパク質をλ-PPaseにより脱リン酸化反応を行い、SDS-PAGEにより分離した。左のゲルは通常のアクリルアミドゲル、右のゲルはビスアクリルアミドの含量を下げたゲルを用いた。このことによりリン酸化タンパク質の検出が容易になる。レーン1、未処理。レーン2、mock処理。レーン3、λ-PPase処理。λ-PPase処理により、分子量の大きいバンドが分子量の最も小さいバンドに収束したことより、PsRBR1タンパク質はリン酸化状態で存在することが明らかになった。

図２　腋芽が休眠状態から成長に移行する時のPsRBR1タンパク質のリン酸化状態を検出した。
(A) 頂芽切除8時間後の腋芽に32P-無機リン酸を取り込ませ、1時間後に腋芽からタンパク質を抽出した。タンパク質抽出液を免疫前血清（レーン2）、抗PsRBR1抗体（レーン3）を用いて免疫沈降を行い、それぞれSDS-PAGEで分離した。免疫沈降前の全タンパク質（レーン1）を示した。
(B) 32P-無機リン酸を腋芽に1時間取り込ませた後、頂芽を切除した。頂芽切除0, 2, 4時間後に腋芽を採取した。腋芽からタンパク質を抽出した後、抗PsRBR1抗体を用いて免疫沈降を行い、それぞれSDS-PAGE （ビス濃度は37.5:1）で分離した（レーン1, 2, 3）。頂芽切除後すぐにPsRBR1タンパク質のリン酸化が増加することがわかる。