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Total cell extract from imaginal discs

yamasaki.y: 2003.10.02

Materials

• Sample Buffer
• Lysis B

Methods

1. 1 x Sample B (Lysis B (-) 20ul に 3x Sample B 10ul を混ぜる) on ice。
2. 幼虫を解剖皿にのせ PBS で洗う。
3. 別の解剖皿のきれいな PBS 中で解剖。
4. サンプルバッファーのチューブに移す。
5. vortex 5 min。
6. boil 3 min。
7. -20'C で保存。

Tips and Comments

• disc を移すときはタングステンニードルで。ピンセットだと毛細管現象で PBS を持ち込んでしまう。
• 抗原にもよるが 1-2 pairs / lane になるように。
• load する前に遠心している。